CULTIVO IN VITRO DE FOLÍCULOS OVARIANOS PRÉ-ANTRAIS DE CUTIAS (Dasyprocta leporina) PREVIAMENTE SUBMETIDOS A DIFERENTES MÉTODOS DE VITRIFICAÇÃO

CULTIVO IN VITRO DE FOLÍCULOS OVARIANOS PRÉ-ANTRAIS DE CUTIAS (Dasyprocta leporina) PREVIAMENTE SUBMETIDOS A DIFERENTES MÉTODOS DE VITRIFICAÇÃO

• Autor
• Náyra Rachel Nascimento Luz
• Co-autores
• Alexandre Rodrigues Silva , Erica Camila Gurgel Praxedes , Luana Grasiele Pereira Bezerra , Samara Sandy Jerônimo Moreira
• Resumo

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  As cutias são animais silvestres que apresentam importantes funções ecológicas por serem dispersadoras de sementes, além de contribuírem para o equilíbrio da cadeia alimentar. Ademais, esses animais são utilizados como modelo experimental, tendo em vista seu potencial reprodutivo, tanto para o aperfeiçoamento de técnicas reprodutivas, quanto para a formação de bancos de germoplasma. Este trabalho teve como objetivo comparar dois métodos de vitrificação (vitrificação em superfície sólida, VSS, vs. ovarian tissue cryosystem, OTC) de tecido ovariano de cutias (Dasyprocta leporina) quanto a conservação da morfologia dos folículos pré-antrais após aquecimento e cultivo in vitro por 24 h. Foram coletados oito pares de ovários de cutias adultas, sexualmente maduras e eutanasiadas, seguindo as recomendações do comitê de ética da UFERSA (Parecer nº 21/2018). Os ovários foram lavados em álcool 70% e Meio Essencial Mínimo (MEM), fragmentados, sendo um primeiro fragmento imediatamente submetido ao processamento e avaliação, constituindo o controle fresco. Os demais folículos ovarianos foram vitrificados, utilizando-se as técnicas de SSV e OTC, expondo-se os fragmentos à solução de vitrificação a 37ºC, constituída de MEM suplementado com 10% de soro fetal bovino (SFB); 0,25 M de sacarose e 3 M de etilenoglicol (EG). Após uma semana, os fragmentos foram aquecidos e submetidos ao cultivo in vitro por 24 horas. Em seguida, as amostras foram submetidas ao processamento histológico, com a desidratação em concentrações crescentes de etanol, a diafanização com xilol, inclusão em parafina histológica e montagem em lâminas, e coloração com Hematoxilina e Eosina, para análise morfológica. Os dados foram expressos em média e erro padrão (±EP), e analisados por ANOVA seguida do teste de Tukey (P<0,05). Observou-se que 53,33 ± 7,9% (135/376) de folículos apresentaram-se morfologicamente normais para o grupo controle fresco. Após a vitrificação, ambos os métodos, SSV (50,00 ± 5,8% – 133/378) e OTC (50,00 ± 5,5% – 126/384) não diferiram entre si, bem como, do grupo controle fresco. Em adição, foi verificado que houve a manutenção da integridade morfológica quando os folículos vitrificados foram submetidos ao cultivo in vitro por 24 horas, observando-se valores de 53,84 ± 6,5% para SSV (158/436) e 50,22 ± 5,7% para OTC (113/378). Assim, o cultivo in vitro evidenciou que ambos os métodos de vitrificação (SSV e OTC) foram eficientes para a manutenção da morfologia folicular in situ da Dasyprocta leporina.

   

• Palavras-chave
• Biobanco, Vida Selvagem, Germoplasma, Ovário, Roedor.
• Área Temática
• Ciências Agrárias

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